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微孔(The well of the Well,WOW)培養(yǎng)系統(tǒng)

? ? ? ?雖然我們周圍的一切都發(fā)生在三維空間,但人類更喜歡在二維空間中重新創(chuàng)造世界。 二維圖畫最早可能始于洞穴壁畫,接著是埃及紙莎草卷,然后是中世紀的壁畫、鑲嵌畫、繪畫和抄本。攝影、電影、電視、電腦屏幕、手機顯示屏——我們的虛擬世界是二維的,直到今天依然如此。雕塑和建筑可能是例外,但文化、教育和科學幾乎完全建立在平面上。重新創(chuàng)造第三維度的零星嘗試,至少在娛樂領域上一次又一次地失敗。技術上是可能的,但人們不感興趣。

? ? ? 同樣的方法在實驗室中占主導地位。即使在體視顯微鏡下,也只能從二維角度察看卵母細胞和胚胎;我們把它們想象成二維的,并為它們提供二維的環(huán)境。軟件和圖象學提供了三維外觀和分析,但主要用于插圖或基于人工智能的分析。人類的智力似乎是不夠的。

? ? ? 對于大多數(shù)目的,兩個維度就足夠了。然而,當我們談到胚胎培養(yǎng)時,可能需要考慮其他的選擇。請不要忘記:對胚胎學家有益的,不一定對胚胎有益。在實驗室里,胚胎是最重要的。

? ? ? 奇怪的是,胚胎學家很長時間都沒有注意到在培養(yǎng)皿底部制造一個微孔用于個體胚胎培養(yǎng)。隨著無透明帶核移植技術的引入,這種方法以保持牛胚胎卵裂球緊密連接為唯一目的被測試。微孔最初是在實驗室里手工用商用金屬針和機械壓力在四孔皿中制備的。后來,商品化WOW培養(yǎng)系統(tǒng)成功地彌補了透明帶和群體效應的缺失,阻止了胚胎的分散,并保持了體內外較高的發(fā)育能力。

       WOW培養(yǎng)系統(tǒng)在其他實驗目的上也有獨一無二的作用,包括培養(yǎng)單個透明帶完整的不同哺乳動物的胚胎??偟膩碚f,WOW培養(yǎng)系統(tǒng)成功地彌補了共同培養(yǎng)效應的缺失,即使是在一個大液滴或一個孔中培養(yǎng)單個胚胎。

       從胚胎的角度看,孔的尺寸似乎越小越好。直徑比透明帶稍大一點的微孔似乎對單個胚胎來說就足夠了。根據(jù)K. Matsuura (RFD, 2013)的計算,WOW內部的小分子和大分子的濃度相差大約兩到三倍,可以稀釋胚胎代謝的產物并提高胚胎周圍的自分泌因子濃度。

       然而,這種效應只在深而窄的微孔中表現(xiàn)出來,直徑大而底部平坦的微孔(例如為時差培養(yǎng)而制備的培養(yǎng)孔)可能具有光學優(yōu)勢,但不能利用微環(huán)境。此外,只有在一步式培養(yǎng)液連續(xù)培養(yǎng)到囊胚期后,才能看到WOW的顯著效果。

       VitaVitro推出的新型WOW培養(yǎng)皿包含不同的微孔組:其中一些適合時差培養(yǎng)(Time-lapse)觀察;另一些則用于充分支持胚胎發(fā)育。胚胎學家可根據(jù)他們的實際需求決定選擇哪一種。微孔培養(yǎng)皿的一個典型的缺陷是氣泡的產生,而VitaVitro? WOW完全消除了這一令人煩惱的問題。

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