? ? ? ?目前有一種觀點(diǎn)，建議我們應(yīng)去除培養(yǎng)液中的酚紅，認(rèn)為酚紅只是一個(gè)pH指示劑，沒(méi)有營(yíng)養(yǎng)和支持功能，可能會(huì)有一些不良影響。對(duì)于顏色，大多數(shù)商業(yè)培養(yǎng)基的pH值范圍很窄（比如7.2-7.6），在這個(gè)范圍內(nèi)，你不能通過(guò)顏色來(lái)判斷pH值。
? ? ? ?持這些觀點(diǎn)的人還認(rèn)為，許多商業(yè)化的培養(yǎng)液，都不含酚紅, 甚至被宣稱為新一代培養(yǎng)液。
? ? ? ?我正在寫一本書(shū)（未出版）給新一代胚胎學(xué)家。然而，在一些問(wèn)題上，我們必須小心。我們目睹了新一代序貫培養(yǎng)液和新一代干式培養(yǎng)箱（出版中的觀點(diǎn)性文獻(xiàn)①）的興衰?；蛘呤恰盁o(wú)毒性”的新一代玻璃化試劑，丙二醇取代了實(shí)際上毒性更小的DMSO…
? ? ? ?讓我對(duì)這一革新嘗試也表示懷疑。
? ? ? ?我們?cè)谑澜缟献罡咝У呐ｓw外胚胎生產(chǎn)系統(tǒng)中一直使用含酚紅的試劑，也在不同物種的玻璃化冷凍試劑中使用。目前沒(méi)有確鑿的證據(jù)表明酚紅對(duì)動(dòng)物或人類胚胎有害。在PubMed分析的3200萬(wàn)篇引用中，沒(méi)有一篇關(guān)注它（用“酚紅”做一個(gè)簡(jiǎn)單的搜索：36個(gè)條目，沒(méi)有一個(gè)是相關(guān)的）。一些摘要和評(píng)論表達(dá)了懷疑，主要是因?yàn)橐恍┓蛹t樣品可能存在潛在的污染物，但我們離任何結(jié)論性的證據(jù)都還很遠(yuǎn)。
? ? ? ?我可能比大多數(shù)人培養(yǎng)出了更多的哺乳動(dòng)物胚胎，總數(shù)接近或超過(guò)7位數(shù)，所以請(qǐng)?jiān)试S我建議考慮以下幾點(diǎn)：
? ? ? ?1. 我不同意酚紅的pH值在7.2-7.6之間沒(méi)有差異。也許0.1的差異很難察覺(jué)，但到了0.2便可以察覺(jué)不同，差異在0.4的話，只有盲人或色盲才看不見(jiàn)。我們有一個(gè)參考酚紅溶液（含Hepes緩沖溶液）顯示的刻度在7到7.8之間。這些溶液每年都準(zhǔn)備好，放在實(shí)驗(yàn)室的架子上便于評(píng)估。
? ? ? ?2. 此外，與普遍的看法相反，pH值0.2的改變（如果起始點(diǎn)在生理范圍之間）對(duì)胚胎是無(wú)害的。然而，你可以在不打開(kāi)培養(yǎng)箱內(nèi)玻璃門或只需瞥一眼在臺(tái)式培養(yǎng)箱中的培養(yǎng)皿，便可立即看到任何劇烈的，有害的pH變化。機(jī)器和傳感器可能會(huì)發(fā)生故障，在哺乳動(dòng)物胚胎學(xué)中，第二個(gè)（或第三個(gè)）水平的控制從來(lái)都是有用的。
? ? ? ?3. 此外，在某些情況下，酚紅可能非常有幫助。舉個(gè)例子：當(dāng)氣體供應(yīng)在一夜之間中斷，你來(lái)到實(shí)驗(yàn)室，看到二氧化碳輸入為零。大多數(shù)培養(yǎng)箱會(huì)發(fā)出警報(bào)，但也可能有少數(shù)時(shí)候不警報(bào)，導(dǎo)致無(wú)法獲知何時(shí)故障?？赡苁窃缟?點(diǎn)，也可能是前一天晚上10點(diǎn)。而且，放在不同位置、不同層、不同隔間的培養(yǎng)皿可能會(huì)對(duì)缺乏氣體產(chǎn)生不同的反應(yīng)。只需看一眼培養(yǎng)皿，你就會(huì)知道，粉紅色——不用擔(dān)心，我們?nèi)匀豢梢岳^續(xù)，藍(lán)色，嗯…
? ? ? ?4. 我也告訴你一個(gè)秘密。當(dāng)我們?cè)谒目着囵B(yǎng)皿中，用400μl油覆蓋400μl培養(yǎng)液，培養(yǎng)50枚牛胚胎時(shí)，從第1天到第7天沒(méi)有體細(xì)胞或培養(yǎng)液的更換，我可以用肉眼告訴你結(jié)果。如果培養(yǎng)基略顯黃色，則是由于活胚的高代謝活性所致。經(jīng)過(guò)一些練習(xí)，這種顏色可用來(lái)預(yù)估囊胚/卵母細(xì)胞率（±5%）。黃色的顯著變化表示50%的提高，即滿意的結(jié)果和健康、快樂(lè)的胚胎。
? ? ? ?你可能會(huì)說(shuō)pH計(jì)也有幫助，但它很復(fù)雜。例如，在第3點(diǎn)描述的崩潰情況下，pH值測(cè)量本身可能會(huì)令胚胎死亡，即使它們?cè)跉怏w問(wèn)題中存活下來(lái)。
? ? ? ?所以，這是一個(gè)選擇，就像在你早上的咖啡里到底加奶還是加糖。有些人不想要糖，因?yàn)樘菚?huì)讓他們發(fā)胖（如果他們只放一塊糖進(jìn)去，就不會(huì)了）。有些人對(duì)乳糖過(guò)敏（但5毫升的牛奶不會(huì)燒壞他們的胃）。真正的決定因素是他們自己的口味（或迷信），而不是結(jié)果，因?yàn)榻Y(jié)果，即胚胎的發(fā)育，都是一樣的。
? ? ? ?總之，酚紅不會(huì)傷害胚胎，但可幫助胚胎學(xué)家。這就是為什么我們的培養(yǎng)基——與一些“新一代”產(chǎn)品相反——含有酚紅。
摘要
①Vajta,Parmegiani, Chen, Yakovenko: Back to the future: optimised micro-well cultureof individual human preimplantation stage embryos. J. Assist. Reprod. Genet.