人類及動(dòng)物卵子和胚胎玻璃化冷凍 – 更好的冷凍載體及技術(shù)

       韋拓生物的玻璃化冷凍液和解凍液在胚胎實(shí)驗(yàn)室中越來越受歡迎。然而，傳統(tǒng)的玻璃化冷凍載體 – ?；瘍龃婀埽ǔㄩ_式拉管，以下簡(jiǎn)稱OPS）卻不是胚胎實(shí)驗(yàn)室中更常見的冷凍載體。原因很簡(jiǎn)單：雖然OPS是首先發(fā)明的，但其它冷凍載體可能有著更好的工業(yè)背景或更多的宣傳。多數(shù)人類胚胎實(shí)驗(yàn)室只聽說過薄片式的高速玻璃化冷凍法，幾乎很少考慮這種方法是否還存在替代方案。在有著可靠的理證據(jù)支撐前，人們不會(huì)冒險(xiǎn)用一個(gè)新的方法來取代現(xiàn)有的方法。

       現(xiàn)在有很好的理由考慮改變。

韋拓生物的OPS有著高標(biāo)準(zhǔn)的生產(chǎn)體系，在全球范圍內(nèi)銷售。OPS有著多種多樣的學(xué)習(xí)和使用方式，包括手冊(cè)、視頻、現(xiàn)場(chǎng)研討會(huì)、在線咨詢以及獨(dú)具創(chuàng)意的教學(xué)APP，該APP詳細(xì)介紹了冷凍、儲(chǔ)存和解凍的全過程。

      與其他冷凍載體相比， OPS在裝載和排出樣品的操作上更加容易，不少玻璃化冷凍領(lǐng)域?qū)＜乙矊?duì)這點(diǎn)表示驚嘆。并且對(duì)于年輕的胚胎學(xué)家來說，成功并持續(xù)地使用OPS也更容易，學(xué)習(xí)和練習(xí)的時(shí)間也更短。

      請(qǐng)相信這些觀點(diǎn)。此外，盡量去避免可能存在的誤解：

       1. 不要認(rèn)為OPS是 “對(duì)傳統(tǒng)技術(shù)的修改” 。事實(shí)恰恰相反，OPS是第一個(gè)專門用于高速玻璃化冷凍的工具和方法。其他工具只是對(duì)其結(jié)構(gòu)和技術(shù)進(jìn)行了調(diào)整。至少可以說，這些調(diào)整并不總像想象中成功。

       2. 就樣本的裝載、冷凍、解凍和排出而言，OPS方法與其他工具不同，但卻更容易，甚至在這些步驟的時(shí)間選擇上都是獨(dú)一無二的。詳細(xì)的操作方法可以再我們的輔助材料中相關(guān)描述。請(qǐng)花幾分鐘去理解它們，再花幾個(gè)小時(shí)去學(xué)習(xí)它們。

? ? ? ?結(jié)果會(huì)證明你的選擇是正確的。第一例經(jīng)玻璃化冷凍人類卵子、原核期及2-細(xì)胞期胚胎誕生的嬰兒均使用了OPS方法。OPS也成功應(yīng)用于動(dòng)物物種的卵母細(xì)胞和胚胎的首次玻璃化冷凍，包括那些沒有透明帶或經(jīng)過各種操作的胚胎。

? ? ?此外，與其他玻璃化冷凍方法相比，OPS方法具有一些獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn):

? ? ? 1. 卵母細(xì)胞和胚胎在OPS管內(nèi)比在薄片上更能避免機(jī)械損傷；

? ? ? 2. 樣品不會(huì)附著在薄片上，而是被冷凍液包裹，在解凍后可輕易排出；

? ? ? 3. 盡管裝載的過程迅速，但液體的體積是恒定的：在確保所需的冷凍和升溫速率的同時(shí)，保護(hù)樣品免受蒸發(fā)和滲透性損傷。

? ? ? ?一個(gè)意想不到的信息是，有觀點(diǎn)認(rèn)為在裝載卵母細(xì)胞/胚胎時(shí)，不應(yīng)該盡量減小液滴量，并且在社交平臺(tái)上進(jìn)行了推廣。而到目前為止，薄片式載體的推薦操作方式仍是建議去除大部分液體，該方式被廣泛推廣，并在全球范圍內(nèi)得到了一定認(rèn)可。

? ? ? ?事實(shí)上，并不是所有人都認(rèn)可去除大部分液體這種方式。一個(gè)純粹但確有效的經(jīng)驗(yàn)：缺少溶液或扁平的液滴可能導(dǎo)致一個(gè)不太理想的結(jié)果，這可能來自滲透性損傷。蒸發(fā)可誘導(dǎo)液體濃度的升高，特別是在層流環(huán)境下。

? ? ? ?我們不得不注意到，這些新的推薦方式，將液滴保持在薄片上的高處，似乎是在重復(fù)發(fā)明，因?yàn)镺PS總是使用更大的液滴和液柱，以完全消除平坦的液滴可能對(duì)卵母細(xì)胞/胚胎的傷害。

? ? ? ?這是一個(gè)歷經(jīng)24年的建議，因?yàn)镺PS最初發(fā)表于1998年。